Práctica V	TEJIDO OSEO
Es objetivo fundamental de esta práctica el estudio del tejido óseo y los mecanismos de osificación. El tejido óseo junto con el cartilaginoso son las variedades del conjuntivo que conocemos como modeladas, ya que constituyen por separado o preferentemente juntos y combinados con otros tejidos como el fibroso denso, nuestro sistema esqueletógeno. En épocas embrionarias se inicia el mecanismo de obtención de tejido óseo o bien directamente desde un tejido conjuntivo, proceso que conocemos como osificación directa o endoconectiva, o bien mediando un paso previo en el que tras formar un molde cartilaginoso este se modifica progresivamente para ir siendo sustituido por tejido óseo. Este segundo mecanismo se conoce como osificación indirecta o endocondral. El tejido óseo resultante puede adoptar, según las exigencias mecánicas a que va a ser sometido, dos tipos diferentes de organización: un patrón compacto o una distribución esponjosa con amplios espacios intertrabeculares ocupados por tejido conjuntivo y medula ósea. Tras el nacimiento el hueso formado inicialmente de una forma rápida y cuya colágena no tenia una distribución especial, tanto el compacto como el esponjoso, va a ser sustituido por otro de colágena mucho mas ordenada y que responde mejor al stress mecánico que va a tener que soportar. A este tipo de hueso se le conoce como secundario, frente al primario de formación embrionaria, o como hueso laminar ya que la colágena en fascículos ordenados constituye unidades repetitivas que conocemos como laminillas óseas. Por carecer de estas estructuras especificas del hueso secundario, al primario también se le conoce como no laminar. En el hueso secundario compacto las laminillas óseas pueden adoptar diferentes patrones de organización, en función básicamente de la dirección de las fuerzas y de la distancia el sistema nutricio vascular. El sistema organizativo mas numeroso son los conocidos como osteonas o sistemas de Havers, en el que alrededor de un conducto central de contenido conjuntivo vascular se disponen 12-15 laminillas concéntricas y entre ellas las células óseas u osteocitos. El hecho de la mineralización de la matriz osteoide que forman las células blásticas del hueso, los osteoblastos, dificulta la técnica histológica de rutina y la observación de todos los constituyentes organizativos del tejido óseo; por ello combinaremos cortes de hueso desmineralizado con tinciones estandar con cortes de hueso sin decalcificar para analizar la organización de la matriz, si bien en este caso no se preserva el compartimento orgánico. Preparados: Mandíbula fetal, hueso largo desmineralizado, hueso largo, costilla y fémur de vaca.   V-1 Mandíbula fetal (Tricrómico de Masson) Visión general: Se ha seleccionado un fragmento de mandíbula fetal, en periodo de osificación, para estudiar el mecanismo endoconectivo de obtener hueso primario. Se observan tres fragmentos en distintos estadios, y en los que debemos de estudiar la celularidad propia del tejido óseo, osteoblastos, osteocitos, osteoclastos y células bordeantes, así como el mesénquima circundante del que están migrando las células precursoras de hueso. Visión específica: A mayores aumentos veremos matriz ósea, tras la desmineralización, de color azulado, y en su interior osteocitos. En la superficie de las trabeculas en formación ribetes epiteloideos de osteoblastos se encargan de ir incrementando el tamaño del hueso en formación. En otras áreas ya se han iniciado los mecanismos resortivos del hueso a expensas de la actividad de los osteoclastos, células multinucleadas gigantes de origen monocítico. El tejido circundante muy bien vascularizado esta poblado por células indiferenciadas que en las proximidades a la zona ósea en formación. Se tratan de elementos osteoprogenitores, y de ellas derivara todo el linaje de los osteoblastos, osteocitos y células de las superficies óseas, siendo estas ultimas las quiescentes a la espera de activarse como respuesta a la información que reciben del entorno, fundamentalemente de los osteocitos intramatriciales. V-1 Mandíbula fetal (Tric.) 10x V-1 Mandíbula fetal (Tric.) 20x Objetivos específicos: Identificar el órgano Analizar la disposición de las trabéculas óseas en formación Estudiar las células del hueso de linaje osteoprogenitor Señalar las células del hueso de monocítico Identificar el mesénquima Particularidades de la tinción en relación a este preparado       V-2 Hueso largo desmineralizado (Hematoxilina-eosina) Visión general: Hemos cortado un hueso largo de conejo siguiendo el eje mayor. Con este preparado vamos a estudiar los mecanismos de osificación endocondral de la metáfisis, y nos servirá para repasar: la organización del cartílago hialino, en este caso el articula; , la osificación endoconectiva de la caña diafisária, y la organización del conjuntivo fibrosos denso que rodea la pieza en formación y que, una vez superada la fase de molde cartilaginoso, pasa de denominarse pericóndrio a periostio. Por fuera quedan fascículos de musculatura estriada y por dentro del molde óseo células de la médula hematopoyética. Visión específica: A mayores aumentos iremos recorriendo la pieza oseocarltilaginosa para ir estudiando el cartílago articular, con la especial orientación de sus células y la ausencia de pericondrio; la existencia de un hueso esponjoso con medula ósea y hueso compacto periférico a nivel de la epífisis; el cartílago fisario o de crecimiento con sus zonas de cartílago en reposo, el área de proliferación, la zona seriada, el área de células hipertróficas, y la zona degenerativa donde se inicia la mineralización; en la diáfisis veremos centralmente y en continuidad con la zona fisaria las trabéculas directrices de naturaleza mixta, un eje cartilaginoso acelular y mineralizado y un rodete de tejido óseo periférico; y final mente en la porción periférica de la diáfisis un hueso que se esta compactando por osificación endoconectiva de carácter aposicional desde el periostio. V-2 Hueso largo 10x V-2 Hueso largo 40x Objetivos específicos: Identificar el órgano Analizar las distintas zonas topográficas: epifisis, metáfisis y diafisis Estudiar la metáfisis con el proceso de osificación endocondral Señalar las trabeculas directrices Identificar el periostio Particularidades de la tinción en relación a este preparado   V-3 Hueso largo (corte transversal por desgaste) Visión general: Hemos realizado un corte transversal, siguiendo el eje menor, en la diáfisis de un hueso largo humano sin decalcificar. Posteriormente lo hemos desgastado hasta que fue lo suficientemente fino para dejar pasar la luz, permitiendo así su visualización microscópica. En la zona periférica de la diáfisis observamos un sistema de laminillas de disposición circunferencial y lo mismo ocurre en la cara interna que vendría a continuarse con la cavidad medular. En la zona central las unidades laminares se organizan repetidamente en osteonas, quedando entre las normoconformadas las antiguas osteonas que fueron parcialmente sustituidas en los procesos de remodelación ósea. Visión específica: Si pasamos a la observación detallada a mayores aumentos, observamos en color pálido la matriz mineralizada dispuestas en laminas paralelas, que bien se adaptan al contorno de la pieza ósea, en el caso de los sistemas circunferenciales externo e interno, o bien lo hacen alrededor de un conducto vascular en el caso de las osteonas, que aparecen interconectados entre si y con las superficies por conductos transversales o de Volkmann. Entre esas laminillas se observan unos pequeños espacios lacunares oscuros, de morfología almendrada, que se corresponden con los osteoceles . Es el lugar que ocupaba el cuerpo de los osteocitos, con esta técnica no preservados. De ellos salen unos canalículos tortuosos e intercomunicados entre si y con los espacios vasculares por donde corrían las expansiones citoplásmicas de los osteocitos permitiendo el intercambio de información y metabolitos. V-3 Hueso largo (desgaste) 10x V-3 Hueso largo (desgaste) 40x Objetivos específicos: Identificar el órgano Analizar los sistemas circunferenciales Estudiar las osteonas, asi como el conducto de Havers y de Volkmann Señalar el lugar que ocupaban los osteocitos y el recorrido de sus prolongacioness Identificar osteonas incompletas Particularidades de la tinción en relación a este preparado       V-4 Costilla (Hematoxilina - eosina) Visión general: Hemos cortado siguiendo el eje menor una costilla humana, planteando con ella el estudio del hueso compacto periférico y la disposición esponjosa central, todo ello envolviendo a la medula ósea. Así mismo nos servirá para repasar la organización del periostio. En este caso por tanto y para preservar las estructuras orgánicas, tanto celulares como fibrosas, previamente a la inclusión hemos decalcificado la pieza. Visión específica: Vemos, con los s de mayor aumento, un tejido fibrosos denso, el periostio, que se continua por fuera con masas musculares intercostales y por dentro con el hueso compacto. Este hueso compacto es de poco espesor si se compara con las cañas de los huesos largos que habíamos estudiado, por ello la organización de los sistemas laminares esta menos desarrollada. De el y hacia el interior se dibujan finas espículas de hueso, estando todas estas superficies rodeadas por una capa fina de conjuntivo que denominamos endostio. La celularidad que ocupa el centro de la costilla pertenece al sistema formador de sangre constituyendo la medula ósea hematopoyética. V-4 Costilla 10x V-4 Costilla 20x Objetivos específicos: Identificar el órgano Analizar el hueso compacto y comparar con la preparación previa Estudiar el hueso esponjoso Particularidades de la tinción en relación a este preparado       V-5 5 Fémur de vaca (corte transversal por desgaste + tinta) Visión general: Hemos seleccionado esta pieza por la orientación especial de los sistemas osteónicos del tercio proximal del fémur de la vaca. Tras un corte por desgaste en este caso hemos realizado una impregnación en tinta para evidenciar mas nitidamente los espacios que estaban ocupados por material orgánico “in vivo”. Visión específica: Si recorremos la preparación observaremos sistemas osteónicos cortados tanto en sentido transversal, como ya habíamos estudiado en el preparado previo, como en sentido longitudinal. Está nueva visión nos facilitara evidenciar los conductos de conexión interosteónico y con las superficies óseas, que sirven para la distribución de los grandes vasos y que denominábamos conductos de Volkmann. V-5 Fémur de vaca 10x V-5 Fémur de vaca (desgaste + tinta) 20x Objetivos específicos: Identificar el órgano Analizar osteonas cortadas longitudinalmente Estudiar las osteonas cortadas transversalmente Señalar los conductos de Havers y de Volkmann Particularidades de la tinción en relación a este preparado

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