Objectiu específic 1. Anàlisi estructural i funcional de proteïnes de la família Vip3

Els resultats han mostrat el paper crucial de l'hèlice α1 del Domini I per a l'activitat insecticida i el manteniment del plegat d'este domini en la conformació de protoxina. Hem trobat la raó del per la qual els Dominis IV i V (C-terminals) són necessaris per a la toxicitat de les proteïnes Vip3A: l'eliminació d'estos dominis impedeix el canvi conformacional del Domini I, necessari per a l'activitat insecticida. També hem constatat que la presència dels dominis I a III és essencial per a la unió als receptors de membrana i que els dominis IV i V no participen en esta unió. 

Utilitzant l'estratègia de immunoprecipitació amb esferes magnètiques covalentement unides a l'anticòs anti-Vip3Aa, hem pogut aïllar potencials molècules receptores de la proteïnes Vip3Aa.  Actualment ens trobem intentant validar estos resultats in vivo mitjançant el silenciament gènic d'estes dos molècules usant la tècnica CRISPR.

Objectiu específic 2. Estudi del mecanisme d'acció de noves proteïnes Cry

Hem clonat i seqüenciat 6 proteïnes de B. thuringiensis, les quals, després d'expressar-les hem analitzat la seua efectivitat enfront de plagues de lepidòpters i de coleòpters.

Els estudis s'han centrat en l'estudi del mecanisme d'acció de Cry1Ia. L'activació produïx una pèrdua en el domini 1 molt rellevant en la producció de l'efecte tòxic. Detectem que la forma activada perd efectivitat en la oligomerització.

Els fragments intermedis transitoris en l'activació de la proteïna Cry1Ia en lepidòpters van mostrar que retenien l'activitat tòxica similar a la protoxina. No obstant això, aquestos fragments no van retindre la toxicitat enfront de l'escarabat de la creïlla. Estos resultats suggerixen un diferent mecanisme d'acció en lepidòpters i coleòpters, perquè per a cadascun dels tipus d'insecte es precisaria un fragment diferent de  per a obtindre l'activitat.

Objectiu específic 3. Nous coneixements sobre el mode d'acció de les proteïnes Cry

Hem descrit el sinergisme dels cristalls produïts pel cep de B. thuringiensis HD1 i la proteïna Vip3Aa i es van mostrar evidències de la presència de proteïna Vip3A en l'espora d'este cep. 

S'ha vist que el sinergisme degut l receptor cadherina i els seus fragments depén de l'espècie d'insecte avaluada. 

L'exposició de dosis subletals de Cry1Ab a larves de Spodoptera minsa no va donar lloc a una adaptació a esta toxina, per la qual cosa podem concloure que l'aplicació de dosis subletals en camp no propícia que els productes perden eficàcia.

Objectiu específic 4. Anàlisi de les bases de la resistència a les proteïnes Cry i Vip3.

Hem analitzat ceps resistents, obtinguts en laboratori, de les espècies Ostrinia furnacalis, Trichoplusia ni, Sesamia nonagrioides i Mythimna separata. En tots els casos, la resistència a proteïnes de la família Cry1 es devia a una falta d'unió al receptor de membrana, mentres que la resistència a Vip3Aa no es devia a això, romanent la causa desconeguda.