Microscopio confocal multifotón montado sobre un microscopio vertical BX61WI motorizado y equipado con un objetivo de inmersión en agua XPLN25xWMP exclusivo para microscopía multifotónica, con una apertura numérica de 1.05 y una distancia de trabajo de 2mm. Dispone del láser Mai-Tai HP DeepSee (Spectra Physics) pulsado sintonizable en el rango de 690 a 1040nm con una potencia media de 2,0 W. Este tipo de láser, al ser infrarrojo, permite una mayor penetración en la muestra y produce menor daño celular. La señal se recoge mediante cuatro detectores que cubren todo el rango del visible (420-500/515-580/590-650/660-740).

• Manual de uso

Sistema confocal multifotón montado sobre un microscopio vertical BX61WI con foco motorizado y equipado con un objetivo de inmersión total en agua XPLN25xWMP especialmente desarrollado para microscopía multifotónica. Este objetivo se caracteriza por su apertura numérica (NA) de 1,05 con una gran distancia de trabajo de 2mm. Esto permite profundizar en la muestra con una buena resolución sin riesgo de aplastar la muestra con el objetivo. La fuente de excitación es un láser pulsado Mai-Tai HP Deep See (Spectra Physics) sintonizable en rango de 690 a 1040nm con una potencia media de 2,0W. La señal de fluorescencia se detecta a través de cuatro tubos fotomultiplicadores que abarcan todo el rango del visible.

Los sistemas multifotón permiten excitar las sondas fluorescentes convencionales con un láser en el rango del infrarrojo mediante la absorción simultánea de dos fotones. Esta excitación bifotónica presenta en principio ciertas ventajas sobre la microscopía confocal convencional:

• Una mayor penetración en los tejidos, ya que hay una menor absorción en el rango del infrarrojo.
• La excitación bifotónica únicamente se produce en el plano focal por lo que la fotodegradación de la muestra o la sonda fluorescente se limita a un pequeño volumen.
• Permite la excitación de sondas que es excitan en el ultravioleta con un láser infrarrojo lo que reduce la fototoxicidad cuando se trabaja con célula viva.