Estudi de la interacció entre fibronectina i integrinas in vivo mitjançant generació i anàlisi de ratolins knockin.

La fibronectina (FN) és una proteïna ubícua i abundant de la matriu extracel·lular (ECM) que uneix altres proteïnes de la ECM (col·làgens, fibrina, proteoglicanos i FN) i molècules d'adhesió cel·lular (integrinas i sindecanos) regulant, d'aquesta manera, l'adhesió, migració, proliferació i supervivència de les cèl·lules. El processat alternatiu de l'únic gen que codifica a la FN dóna lloc a múltiples isoformes. En els teixits les cèl·lules secreten FN com un dímero soluble que posteriorment s'ensamblarà formant fibres multimériques insolubles que es dipositen en la superfície cel·lular, mentre que en el plasma es troba abundantment en forma soluble.

Nombrosos experiments in vitro o amb cèl·lules en cultiu demostren la important funció dels motius de la FN implicats en la unió a integrinas. Els ratolins deficients en FN moren molt primerenc durant el desenvolupament embrionari i amb defectes en el mesodermo. A més l'anul·lació de les principals integrinas que interaccionen amb FN, com són la a5 i la a4, genera complexos fenotips de letalidad molt primerenca durant el desenvolupament embrionari, quedant poc clara la contribució in vivo de la *FN a la funció de cadascuna d'aquestes integrinas.

El nostre laboratori està generant diferents ceps de ratolins knock-in que expressen fibronectina amb mutacions en els motius d'unió a integrinas i pretén analitzar les seves conseqüències funcionals durant el desenvolupament embrionari i en el sistema immune.

Els ceps de ratolins amb les quals estem treballant, són les següents:

1. ratolins en els quals el motiu RGD de FNIII10 s'ha substituït per RGE. Aquesta substitució anul·la la interacció entre la FN-RGD amb les integrines a5ß1 i avß3 in vivo. Els principals trets fenotípics d'aquests mutants són: una angiogénesis defectiva i una truncació en el procés de somitogénesis.
2. ratolins que expressen FN amb la regió variable (FN-IIICS) mutada. Aquesta mutació anul·la la unió de les integrines a4ß1 i a4ß7 . Hematopoyesis, vasculogénesis i extravasació de leucocits cap a llocs d'inflamació són les funcions que probablement estiguin alterades en aquests mutants.
3. ratolins amb mutacions en el lloc sinérgic de la unió intervinguda per RGD, situat en el mòdul FNIII9. Esperem defectes en el desenvolupament relacionats amb falta de modulació de l'activació per integrines depenents de FN-RGD.

Estudi del paper del perlecan durant el desenvolupament del cervell mitjançant ratolins knock-out

Les matrius extracel·lulars són entramats moleculars que controlen la proliferació i diferenciació cel·lular. Entre els seus components es troben els proteoglicans de heparán sulfat, que són proteïnes que porten cadenes de sucres altament modificats que uneixen factors de creixement.

El nostre grup està interessat en un d'aquests proteoglicans, anomenat perlecan, que juga un important paper en processos com el manteniment de la integritat de les làmines basals, morfogènesi, angiogènesi, metàstasi tumoral i reparació de teixits.